一，骨组织切片及trap染色实验步骤：
1、骨组织脱钙要求：新鲜骨组织固定于4％多聚甲醛24h以上。将组织从固定液取出置于EDTA脱钙液内脱钙（不能用含酸的脱钙液脱钙），每3天换一次脱钙液，至骨组织针扎可以顺利通过为止。
2、取材：在通风橱内用手术刀将目的部位组织修平整，将修切好的组织和对应的标签放于脱水盒
3、脱水：将脱水盒放进吊篮里于脱水机内依次梯度酒精进行脱水。75％酒精4h-85％酒精 2h-90％酒精2h-95％酒精1h-无水乙醇I30min-无水乙醇II 30min-醇苯5-10min-二甲苯I5-10min-二甲苯II 5-10min-蜡I 1h-蜡II 1h-蜡iii 1h
4、包埋：将浸好蜡的组织于包埋机内进行包埋。先将融化的蜡放入包埋框，待蜡凝固之前将组织从脱水盒内取出按照包埋面的要求放入包埋框并贴上对应的标签。于-20°冻台冷却，蜡凝固后将蜡块从包埋框中取出并修整蜡块。
二，传统方法
1.将骨标本置于盛有脱钙液的容器中放入小型台摇床上（摇床振荡为了更好的是脱钙液和骨标本充分接触），每天更换一次脱钙液。
2.传统方法实物图
三，小美超声脱钙仪脱钙
1.产品介绍：小美超声XM-202A超声脱钙仪是一款能使骨标本快速脱去钙质的方法，采用独特脱钙液配方在超声波引导下，实现快速而又安全地将磷酸钙、磷酸镁、碳酸钙等晶体分子解体，在微波加速下完成 脱钙、固定与中性缓冲过程，同时100%保存组织形态结构和样本的抗原特性，有利于后续进行的抗原修复处理。整个过程具有定时控温满足不同实验要求。
2.实验步骤：将骨标本置于盛有脱钙液的容器中放入脱钙机（注意脱钙仪水槽中的水位要高于骨标本脱钙液的水位。）设好时间360h（15天），温度37℃。
3.实验实物图：
4.实验结果：将超声15天的骨标本切片后能满意染色，组织无皱缩或肿胀等伪迹，保证制作成切片后的优片率达95%以上，非常有利于后续的组织学处理，尤其是免疫组化染色，甚至满足后续DNA检测项目。
四，传统方法(超声波细胞破碎仪)和超声脱钙方法对比
1.节省脱钙时间：使用快速脱钙液骨髓穿刺、耳鼻软骨组织脱钙时间比常规脱钙节省75%；对高密度的骨皮质脱钙时间比传统方法缩短40%至60%。
2.样品温控：37℃（温度可调）.可避免或缓解因组织与脱钙液发生化学反应而产生的升温；超过摄氏50度时，还会破坏或改变骨标本的显微组织形态，影响实验的准确性。
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